Hướng dẫn kỹ thuật cho bộ dụng cụ xét nghiệm ELISA cho vi khuẩn lignin (Lignin)

BS-5184 Bộ dụng cụ vi sinh lignin (Lignin) ELISA

1. Tổng quan về sản phẩm

Bộ dụng cụ này sử dụng phương pháp hấp phụ miễn dịch liên kết enzyme biantibody sandwich (ELISA), đặc biệt để phát hiện định lượng hàm lượng lignin trong các mẫu như dung dịch lên men vi sinh vật, dung dịch lysis tế bào, v.v. Lignin là một polymer thơm được tạo ra trong quá trình chuyển hóa hoặc làm suy giảm thành tế bào thực vật của vi sinh vật, sự thay đổi nội dung có thể phản ánh hiệu quả sử dụng của vi sinh vật đối với lignocellulose.

2. Nguyên tắc phát hiện

Các gói kháng thể pha rắn được chụp bởi một tấm micropore lignin trong mẫu, sau đó được thêm vào để phát hiện sự hình thành kháng thể'kháng thể-kháng nguyên-kháng thể-enzyme'phức tạp. Sau khi rửa, chất nền TMB được thêm vào, độ hấp thụ được xác định ở bước sóng 450nm và giá trị hấp thụ tương quan tích cực với nồng độ lignin.

3. Thành phần bộ dụng cụ

Thành phần 96 Cấu hình lỗ 48 Cấu hình lỗ Điều kiện bảo quản

Tấm Enzyme Micropore 12 lỗ × 8 dải 12 lỗ × 4 dải 2-8 ℃ Niêm phong khô

Tiêu chuẩn (lignin) 0,5mL × 6 ống 0,5mL × 6 ống -20oC tránh ánh sáng

Mẫu pha loãng 6mL 3mL 2-8oC

Kháng thể Enzyme-HRP 10mL 5mL 2-8 ℃ Bảo vệ khỏi ánh sáng

20 × Bộ đệm giặt 25mL 15mL Nhiệt độ phòng

Chất lỏng kết xuất màu TMB 9mL 4,5mL 2-8 ℃ Tránh ánh sáng

Chấm dứt 9mL 4.5mL Nhiệt độ phòng

Niêm phong tấm phim 2 tờ 2 tờ Nhiệt độ phòng

4. Xử lý mẫu

4.1 Chất lỏng lên men vi sinh

8000 × g Ly tâm 10 phút để loại bỏ nấm

Lấy chất lỏng sạch để phát hiện ngay lập tức hoặc đóng băng -80 ℃ (tránh đông lạnh lặp đi lặp lại)

4.2 Tế bào lysis

12000 × g ly tâm 15 phút sau khi phá vỡ siêu âm

Phát hiện sau khi pha loãng PBS 10 lần với chất lỏng làm sạch

4.3 Thận trọng

Mẫu đục cần lọc màng lọc 0,22μm

Tránh các mẫu có chứa natri azide (ức chế hoạt động HRP)

5. Các bước thử nghiệm

5.1 Chuẩn bị thuốc thử

Dung dịch giặt: Nước cất pha loãng 20 lần đến 1 × dung dịch làm việc

Gradient tiêu chuẩn: pha loãng đến 0-60 μg/mL theo hướng dẫn

5.2 Thêm mẫu

Tiêu chuẩn/mẫu mỗi 50μL Thêm micropores tương ứng

Ủ ở 37 độ C trong 30 phút

5.3 Rửa

Mỗi lỗ thêm 300μL dung dịch rửa, để yên 1 phút sau khi vỗ khô

Lặp lại 5 lần

5.4 Kết xuất màu

Kháng thể enzyme 100 μL mỗi lỗ, ủ ở 37 ° C trong 30 phút

Chất lỏng kết xuất màu TMB 90 μL sau khi giặt, tránh ánh sáng 15 phút

Kết thúc 50 μL Kết thúc phản ứng

5.5 Xác định

Bước sóng 450nm Xác định giá trị ODD (tham chiếu bước sóng 630nm)

6. Tính toán kết quả

Vẽ đường cong tiêu chuẩn với nồng độ hàng tiêu chuẩn là tọa độ ngang và giá trị ODD là tọa độ dọc. Nồng độ mẫu được tính bằng phương trình đường cong, vượt quá phạm vi cần pha loãng và kiểm tra lại.

7. Chỉ số hiệu suất

Chỉ số tham số

Độ nhạy ≤0,5μg/mL

Phạm vi phát hiện 1-60μg/mL

Độ chính xác CV trong lô<8%, CV trong lô<12%

Tỷ lệ phục hồi 85% -115%

8. Thận trọng

Cần cân bằng nhiệt độ phòng trong 30 phút trước khi sử dụng bộ dụng cụ

Thuốc thử số lô khác nhau không thể trộn lẫn

Chấm dứt chất lỏng có chứa axit mạnh và đeo thiết bị bảo hộ khi vận hành

Chất lỏng kết xuất màu Tránh tiếp xúc với ion kim loại

Micropipet cần được hiệu chuẩn để tránh ô nhiễm chéo

9. Ngày hết hạn

6 tháng (bảo quản 2-8 ℃)

10. Tuyên bố

Sản phẩm này chỉ dành cho mục đích nghiên cứu khoa học.

Lưu ý: Trên đây chỉ để tham khảo, thuốc thử này chỉ dành cho nghiên cứu khoa học, không phải là dữ liệu thực tế, các thí nghiệm cần tuân thủ nghiêm ngặt các hướng dẫn hoặc tư vấn cho giáo viên kỹ thuật.

Microbiome lignin (Lignin) ELISA thử nghiệm kit hướng dẫn kỹ thuật Bunsen luôn coi kiểm soát chất lượng là cuộc sống của doanh nghiệp và theo đuổi sự cạnh tranh ngày càng tăng của doanh nghiệp. Công ty trong hoạt động luôn tuân thủ: tuân thủ luật pháp, nghiêm khắc với bản thân, khoan dung, dám đảm nhận tinh thần doanh nghiệp như một tiêu chuẩn, với chất lượng vượt trội và dịch vụ tuyệt vời để duy trì và mở rộng thị trường, đáp ứng nhu cầu của khách hàng ở mức độ lớn hơn. Cùng thắng lợi với khách hàng, là mục tiêu phát triển của chúng tôi. Ben! Đối tác tin cậy của bạn. Chúng tôi sẵn sàng hợp tác chân thành với bạn để tạo ra một tương lai tốt đẹp. Bộ dụng cụ Bunsen