Hướng dẫn kỹ thuật cho bộ dụng cụ xét nghiệm ELISA 1,5-Diphosphonucleon Glycarboxylase (RuBisCO) cho thực vật

BS-4938 Thực vật 1,5-Diphosphonucleon Glycarboxylase (RuBisCO) ELISA Kit 96T/48T

Tổng quan sản phẩm

Bộ dụng cụ này được sử dụng để phát hiện định lượng in vitro hoạt động của nucleoketose-1,5-diphosphate carboxylase/oxygenase (RuBisCO) trong mô thực vật, tế bào và các mẫu chất lỏng liên quan. Enzyme này là một enzyme quan trọng trong chu trình Calvin cho quang hợp thực vật và hoạt động của nó ảnh hưởng trực tiếp đến tốc độ quang hợp và quá trình quang hô hấp. Bộ dụng cụ này sử dụng phương pháp hấp phụ miễn dịch liên kết enzyme biantibody sandwich (ELISA) và có độ nhạy và đặc hiệu cao.

Nguyên tắc phát hiện

Bộ dụng cụ áp dụng phương pháp kẹp một bước kháng thể kép:

Prepacked Enzyme mục tiêu trong mẫu được thu thập bởi một tấm microporous chống RuBisCO-mumab

Phát hiện sự hình thành kháng thể'kháng thể kháng nguyên-enzyme'phức tạp với HRP đánh dấu

Sau khi rửa sạch, thêm chất nền kết xuất màu TMB

Sau khi kết thúc phản ứng, máy đo enzyme xác định độ hấp thụ (giá trị ODD) ở bước sóng 450nm

Nồng độ RuBisCO trong mẫu tương quan dương với giá trị ODD

Thành phần Kit

Thông số kỹ thuật thành phần Điều kiện bảo quản

Tấm micropore 12 × 8 lỗ 4 ℃

Sản phẩm tiêu chuẩn (6 gradient nồng độ) 0,3mL × 6 ống -20 ℃

Kháng thể Enzyme 15mL 4 ℃

20 × Bộ đệm giặt 50mL Nhiệt độ phòng

TMB chất lỏng kết xuất màu A/B 15mL mỗi 4 ℃ tránh ánh sáng

Chấm dứt 15mL Nhiệt độ phòng

Chất lỏng pha loãng mẫu 30mL 4 ℃

Xử lý mẫu

Mẫu mô

Cân bằng 0,1g mô, thêm 1mL chiết xuất nước đá tắm san lấp mặt bằng

10,000g 4 ℃ ly tâm 10 phút

Lấy chất lỏng sạch để phát hiện ngay lập tức hoặc bảo quản ở -80 ℃ (tránh đông lạnh lặp đi lặp lại)

Mẫu tế bào

Thu thập lượng mưa tế bào, tham gia vào quá trình tách chiết

10,000g 4 ℃ ly tâm 10 phút

Kiểm tra chất lỏng sạch.

Mẫu huyết thanh/chất lỏng

Để 2 giờ hoặc 4 ℃ qua đêm ở nhiệt độ phòng

1,000g ly tâm 20 phút

Kiểm tra chất lỏng sạch.

Lưu ý:

Tránh tan máu mẫu

NaN3 ức chế hoạt động HRP

Ưu tiên mẫu tươi, mẫu đông lạnh tránh đông lạnh lặp đi lặp lại

Các bước hoạt động

Chuẩn bị thuốc thử: Tất cả các thuốc thử được cân bằng đến nhiệt độ phòng (20-25 ° C) trước khi sử dụng

Thêm mẫu:

Tiêu chuẩn sản phẩm lỗ: 50μL nồng độ khác nhau sản phẩm tiêu chuẩn

Lỗ mẫu: 50μL mẫu để kiểm tra

Lỗ trống: Không thêm

Ôn sinh: 100 μL kháng thể enzyme được thêm vào mỗi lỗ, phản ứng tránh ánh sáng 37 ℃ trong 60 phút

Rửa: mỗi lỗ thêm 350μL dung dịch rửa, để yên 1 phút sau đó quăng khô, lặp lại 5 lần

Kết xuất màu: 50 μL chất nền A và B được thêm vào mỗi lỗ, phản ứng tránh ánh sáng 37 ℃ trong 15 phút

Chấm dứt: Thêm 50 μL chấm dứt mỗi lỗ

Xét nghiệm: Xác định giá trị OD450nm bằng máy đo enzyme trong 15 phút

Tính toán kết quả

Vẽ đường cong tiêu chuẩn với nồng độ hàng tiêu chuẩn là tọa độ ngang và giá trị ODD là tọa độ dọc

Đo nồng độ trên đường cong tiêu chuẩn dựa trên giá trị ODD mẫu

Nồng độ mẫu=nồng độ đo được × bội số pha loãng (nếu có)

Chỉ số hiệu suất

Phạm vi phát hiện: 18-650 U/L

Độ nhạy: ≤5 U/L

Hệ số đột biến trong lô:<10%

Hệ số biến thiên giữa các lô:<15%

Lưu ý

Thời hạn sử dụng của bộ dụng cụ 6 tháng, 2-8 ℃ Bảo quản

Thuốc thử số lô khác nhau không thể trộn lẫn

Chất lỏng kết xuất màu Bảo quản tránh ánh sáng

Rửa không sạch sẽ dẫn đến dương tính giả

Chất kết thúc chứa các chất ăn mòn, cần được bảo vệ khi vận hành

Tất cả chất thải được xử lý theo vật liệu nguy hiểm sinh học

Dụng cụ cần thiết

Máy đo Enzyme (Bộ lọc 450nm)

Pipette chính xác (0,5-1000 μL)

Hộp nhiệt độ 37 ℃

Máy giặt tấm (tùy chọn)

Máy trộn Scroll

Ghi chú: Cung cấp cho nghiên cứu khoa học sử dụng, tài liệu trên cung cấp tham khảo, không làm căn cứ thí nghiệm, cụ thể mời giáo viên kỹ thuật tư vấn là hoặc thương hiệu.

Thiên Tân luôn coi kiểm soát chất lượng là cuộc sống của doanh nghiệp, theo đuổi sức cạnh tranh của doanh nghiệp không ngừng nâng cao. Công ty trong hoạt động luôn tuân thủ: tuân thủ luật pháp, nghiêm khắc với bản thân, khoan dung, dám đảm nhận tinh thần doanh nghiệp như một tiêu chuẩn, với chất lượng vượt trội và dịch vụ tuyệt vời để duy trì và mở rộng thị trường, đáp ứng nhu cầu của khách hàng ở mức độ lớn hơn. Cùng thắng lợi với khách hàng, là mục tiêu phát triển của chúng tôi.