Thí nghiệm Elisa: Vấn đề đường cong Elisa

Các vấn đề với đường cong trong các thí nghiệm ELISA chủ yếu là do các sản phẩm tiêu chuẩn, hoạt động hoặc thiết bị không đúng chỗ. Kết luận cốt lõi: Các vấn đề thường xuất phát từ việc xử lý sản phẩm tiêu chuẩn, thao tác thêm mẫu hoặc điều kiện ấp trứng, việc kiểm tra các liên kết này có thể được xác định nhanh chóng.

Nguyên nhân phổ biến của đường cong tiêu chuẩn kém

Sản phẩm tiêu chuẩn hòa tan và pha loãng không đúng cách

Bột tiêu chuẩn không hòa tan đầy đủ, hoặc pha loãng không trộn đều, dẫn đến nồng độ không chính xác.

Lời khuyên: Pha loãng với dung dịch được chỉ định theo hướng dẫn, ly tâm ngắn sau khi hòa tan, đầu súng mới khi pha loãng gradient, thổi hoặc xoáy đều.

Thao tác mẫu không chính xác

Bộ dịch không hiệu chỉnh, hoặc tốc độ gia mẫu, góc độ không nhất trí, sự khác biệt về thể tích giữa các lỗ lớn.

Khuyến nghị: Định kỳ hiệu chỉnh pipet, thẳng đứng và trơn tru khi lấy mẫu, đầu súng được gắn vào bề mặt lỏng nhưng không chạm đáy, tránh bong bóng khí.

Điều kiện ủ không ổn định ‌

Không niêm phong màng hoặc nắp không chặt, dẫn đến hiệu ứng cạnh; Thời gian nhiệt độ không ổn định.

Đề nghị: Dùng màng niêm phong chất lượng cao, đặt máy ấp trứng nhiệt độ ổn định, tránh ấp trứng tự nhiên.

B5-05=giá trị thông số Kd, (cài 2)

Tổng thể thấp

Nguyên nhân có thể: thuốc thử quá hạn, sản phẩm tiêu chuẩn không hòa tan, sau khi ngừng dịch không kiểm tra ngay, hỗn hợp thuốc thử.

Đề nghị: Bảo quản thuốc thử theo hướng dẫn sử dụng, ly tâm trước khi hòa tan sản phẩm tiêu chuẩn, trộn đều sau khi pha loãng, kiểm tra ngay sau khi chấm dứt dịch.

Không có tín hiệu ‌

Nguyên nhân có thể xảy ra: hết hạn tác nhân, nhiễm enzyme HRP, lỗi vận hành (ví dụ: sai thứ tự bổ sung).

Khuyến nghị: Kiểm tra nhãn thuốc thử, sử dụng nước cất tươi với dung dịch đệm, cân bằng nhiệt độ phòng của thuốc thử trong 30 phút.

Tổng thể cao

Nguyên nhân có thể: phạm vi mật độ ánh sáng quá rộng của máy đo enzyme, nồng độ chất lỏng làm việc cao, thời gian ủ lâu/nhiệt độ cao.

Đề nghị: Phạm vi mật độ ánh sáng được đặt 0-3,5, chất lỏng làm việc được sử dụng hiện tại, kiểm soát nhiệt độ hộp ấp 37 ± 0,5 ℃.

III. Tư vấn tối ưu

Xử lý sản phẩm tiêu chuẩn: ly tâm trước khi hòa tan, trộn đều sau khi pha loãng.

Hoạt động lấy mẫu ‌ Hiệu chuẩn pipet, lấy mẫu theo chiều dọc và trơn tru, tránh bong bóng.

Điều kiện ấp trứng: niêm phong bằng màng niêm phong, bảng enzyme đặt máy ấp trứng nhiệt độ không đổi.

Kiểm tra thiết bị‌Định kỳ hiệu chỉnh pipette, máy đo enzyme đặt phạm vi mật độ ánh sáng chính xác.

Lưu ý: Trên đây chỉ để tham khảo, sản phẩm này chỉ dành cho nghiên cứu khoa học, không phải là dữ liệu thực tế, các thí nghiệm cần tuân thủ nghiêm ngặt các hướng dẫn hoặc tư vấn cho giáo viên kỹ thuật.

ELISA Kit Thiên Tân Bunsheng luôn coi kiểm soát chất lượng là cuộc sống của doanh nghiệp và theo đuổi sự gia tăng liên tục trong khả năng cạnh tranh của doanh nghiệp. Công ty trong hoạt động luôn tuân thủ: tuân thủ luật pháp, nghiêm khắc với bản thân, khoan dung, dám đảm nhận tinh thần doanh nghiệp như một tiêu chuẩn, với chất lượng vượt trội và dịch vụ tuyệt vời để duy trì và mở rộng thị trường, đáp ứng nhu cầu của khách hàng ở mức độ lớn hơn. Cùng thắng lợi với khách hàng, là mục tiêu phát triển của chúng tôi. Ben! Đối tác tin cậy của bạn. Chúng tôi sẵn sàng hợp tác chân thành với bạn để tạo ra một tương lai tốt đẹp. Bộ dụng cụ Bunsen