Trong các dụng cụ chính xác của phòng thí nghiệm, sắc ký lỏng giống như một "nhà phân tích" nghiêm ngặt, thực hiện nhiệm vụ quan trọng là tách và phát hiện các hợp chất. Tuy nhiên, "chuyên gia chính xác" này cũng có thể gặp trục trặc do nhiều nhân tố, ảnh hưởng đến hiệu quả thí nghiệm và độ chính xác của dữ liệu. Bài viết này sẽ xem xét các lỗi thường gặp của sắc ký lỏng, cung cấp các chương trình sửa chữa thực tế và tóm tắt các điểm bảo trì hàng ngày để giúp bạn giữ cho thiết bị của mình ở trạng thái tốt nhất mọi lúc.
Căng thẳng bất thường: cảnh báo "huyết áp" cho sắc ký lỏng
Căng thẳng là một chỉ số cốt lõi của hoạt động sắc ký lỏng, giống như huyết áp của cơ thể, quá cao hoặc quá thấp đều báo hiệu các vấn đề tiềm ẩn.
Báo động điện áp cao thường liên quan đến tắc nghẽn dòng chảy. Khi áp suất hệ thống tăng đột ngột, bạn có thể kiểm tra từng bước theo thứ tự dòng chảy: đầu tiên ngắt kết nối đầu vào cột sắc ký, nếu áp suất giảm, chỉ ra điểm tắc nghẽn trong cột sắc ký hoặc đường ống tiếp theo; Nếu áp suất vẫn cao, bạn cần kiểm tra van một chiều, bộ nạp mẫu và đầu bơm. Khi sửa chữa, có thể rửa bằng dung dịch axit nitric 5% cho các đường ống bị tắc nhẹ; Ô nhiễm van một chiều cần tách ra làm sạch siêu âm, nếu van bị mòn thì cần thay thế.
Báo động điện áp thấp chủ yếu là do rò rỉ hoặc cạn kiệt dung môi. Trước tiên quan sát xem chỗ nối có giọt nước hay không, đầu nối lỏng lẻo cần thắt chặt lại, vòng kín bị mài mòn phải kịp thời thay thế; Nếu bề mặt chất lỏng của chai dung môi quá thấp, sau khi bổ sung dung môi cần xả bong bóng khí, tránh khoang bơm vào không khí hình thành khóa khí.
Sự bất thường cơ bản: Kẻ giết người vô hình với độ chính xác dữ liệu
Sự ổn định của đường cơ sở ảnh hưởng trực tiếp đến kết quả phát hiện và các vấn đề cơ sở phổ biến bao gồm trôi dạt, tiếng ồn và đỉnh ma.
Sự trôi dạt cơ bản có thể bắt nguồn từ biến động nhiệt độ cột, thay đổi tỷ lệ phù hợp dòng chảy hoặc ô nhiễm máy dò. Cần đảm bảo rằng nhiệt độ hộp nhiệt độ cột ổn định trong vòng ± 0,1 ℃; Sử dụng chế độ trộn trực tuyến khi trộn pha dòng chảy, giảm lỗi tỷ lệ thủ công; Nếu bể lưu thông của máy dò bị ô nhiễm, có thể rửa ngược dung dịch hỗn hợp methanol - nước, chất ô nhiễm cứng đầu có thể thử ngâm dung dịch axit nitric loãng.
Tiếng ồn cơ bản thường liên quan đến xung bơm quá lớn, đèn phát hiện không đủ năng lượng hoặc bong bóng khí trong đường ống. Kiểm tra xem van giảm chấn của máy bơm có bị hỏng hay không và thay thế nó nếu cần thiết; Thường xuyên theo dõi thời gian sử dụng của đèn dò, thay thế trước khi gần tuổi thọ; Bong bóng trong hệ thống cần được loại bỏ bằng cách khử khí đầy đủ (ví dụ: khử khí chân không, khử khí siêu âm) và hoạt động xả purge.
Ghost Peak chủ yếu là do ô nhiễm mẫu, tạp chất pha chảy hoặc dư lượng của bộ nạp mẫu. Sử dụng thùng chứa sạch khi xử lý mẫu, pha chảy cần phải sử dụng thuốc thử cấp sắc ký và lọc bằng màng lọc 0,22 μm; Kim mẫu được rửa bằng pha chảy trước khi lấy mẫu, và van mẫu được làm sạch sau khi kết thúc thí nghiệm.
Lưu giữ thời gian trôi dạt: một "yếu tố không ổn định" của hiệu ứng tách
Độ lặp lại của thời gian lưu giữ là chìa khóa để phân tích sắc ký lỏng và các vấn đề trôi dạt chủ yếu liên quan đến sự thay đổi pH pha lỏng, sự lão hóa của cột sắc ký hoặc tốc độ dòng chảy không ổn định.
Biến động pH pha lỏng có thể ảnh hưởng đáng kể đến hành vi giữ lại của các hợp chất ion, cần phải kiểm soát độ pH bằng dung dịch đệm và nồng độ muối đệm không nên quá thấp (thường không dưới 5mmol/L); Cột sắc ký sau khi sử dụng lâu dài của giai đoạn cố định bị mất, có thể đánh giá hiệu quả cột bằng cách kiểm tra thời gian lưu giữ của sản phẩm tiêu chuẩn, khi hiệu quả cột giảm nghiêm trọng cần thay thế cột mới; Tốc độ dòng chảy không ổn định cần kiểm tra vòng đệm và van một chiều của máy bơm, các bộ phận bị mòn được thay thế kịp thời, đồng thời đảm bảo thông khí trơn tru của chai dung môi, tránh áp suất âm ảnh hưởng đến tốc độ dòng chảy.
Bảo trì hàng ngày: "Key Password" để kéo dài tuổi thọ của thiết bị
Phòng ngừa tốt hơn sửa chữa, bảo trì hàng ngày khoa học có thể làm giảm đáng kể sự cố. Sau khi kết thúc thí nghiệm hàng ngày, hệ thống rửa bằng dung môi tinh khiết (methanol cho cột pha ngược, n-hexane cho cột pha tích cực), tránh chặn đường ống bằng tinh thể muối đệm; Kiểm tra độ kín của từng khớp mỗi tuần, làm sạch cửa sổ máy dò và đĩa mẫu; Thay đổi vòng đệm rôto của bộ nạp mẫu hàng tháng, hiệu chỉnh hộp nhiệt độ cột và bước sóng của máy dò; Bảo trì máy bơm được thực hiện hàng quý, bao gồm thay thế vòng đệm, làm sạch van một chiều và kiểm tra cảm biến áp suất.
Ngoài ra, điều quan trọng là phải duy trì hồ sơ về việc sử dụng dụng cụ, ghi lại chi tiết từng lần bảo trì, các bộ phận thay thế và xử lý sự cố để dễ dàng truy tìm nguồn gốc của vấn đề. Đồng thời, việc xác minh hiệu suất của thiết bị, chẳng hạn như kiểm tra biến động áp suất, tiếng ồn cơ bản và độ lặp lại thời gian lưu giữ, được thực hiện thường xuyên để đảm bảo thiết bị ở trạng thái đủ điều kiện.
Hoạt động hiệu quả của sắc ký lỏng không thể tách rời với phán đoán chính xác về sự cố và xử lý kịp thời, phụ thuộc nhiều hơn vào hoạt động hàng ngày và bảo trì thông số kỹ thuật。Nắm vững các kỹ thuật sửa chữa và bảo trì lỗi này cho phép bạn đối phó với các vấn đề khác nhau trong các thí nghiệm và cho phép các thiết bị chính xác luôn cung cấp hỗ trợ dữ liệu đáng tin cậy cho nghiên cứu khoa học.
