Thông tin cột chuyên dụng
Venusil stachydrine cột sắc ký đặc biệt của hydrochloride hydrochloride hydrochloride được thiết kế đặc biệt để phân tích hydrochloride từ cây mẹ. Sản phẩm này sử dụng silicone làm ma trận, pha liên kết do việc sử dụng nhóm amide trung tính, có tính chọn lọc tốt đối với các hợp chất hữu cơ kiềm hòa tan trong nước, phân cực mạnh trong chế độ sắc ký ưa nước.
HILIC là một chế độ sắc ký hành động hydrophilic, tẩy rửa được sắp xếp theo thứ tự tăng hydrophilic/phân cực của hợp chất, tăng tỷ lệ pha hữu cơ trong pha chảy sẽ làm tăng lưu giữ dung môi, pha dòng chảy điển hình là acetonitrile (40% - 97%)/nước (hoặc muối đệm dễ bay hơi), đồng thời nó có thể sử dụng pha dòng chảy dễ bay hơi hơn hoặc muối đệm, tạo điều kiện thuận lợi cho việc kết hợp với máy dò phổ khối và máy dò ánh sáng bay hơi.
Hydrochloride Phương pháp thử nghiệm và bản đồ phân tích
Tham khảo các điều kiện sắc ký dưới một bộ xác định hàm lượng cỏ ích mẫu trong dược điển Trung Quốc phiên bản 2015:
Silicone liên kết propylamide được sử dụng làm chất độn và dung dịch axit axetic băng 0,2% (80:20) được sử dụng làm pha chảy, được phát hiện bởi máy dò tán xạ ánh sáng bay hơi. Yêu cầu tính toán số lượng bảng tháp lý luận không thấp hơn 6000.
Cột sắc ký: Venusil stachdrine 5μm，4.6*250mm
Số đặt hàng: VH952505-LH
Pha chảy: Acetonitrile: dung dịch axit axetic băng 0,2%=80: 20 (v/v)
Tốc độ dòng chảy: 0,5 mL/phút
Nhiệt độ cột: 20 ℃
Máy dò: ELSD (Máy dò tán xạ hơi nước)
Khối lượng mẫu: 10μL
Thời gian giữ/phút |
Số lượng tháp lý thuyết |
Hệ số kéo |
17.888 |
15203 |
1.06 |
cài đặt
1, Tháo hộp đóng gói cột, xác nhận loại, thông số kỹ thuật của cột sắc ký.
2. Tháo nắp đậy kín ở hai đầu cột đặt lại hộp đóng gói dự phòng.
3, Theo dòng chảy pha được đánh dấu trên ống cột, sử dụng đầu PEEK và ống PEEK hoặc ống thép không gỉ để kết nối cột sắc ký với dụng cụ phát hiện.
4, sử dụng đường kính bên trong nhỏ của các phụ kiện kết nối, cột phân tích thường sử dụng đường kính bên trong 0,25 mm (0,010 ") của đường ống, và rút ngắn chiều dài của đường ống kết nối, do đó làm giảm khối lượng chết.
Sử dụng và bảo trì
Bảo vệ
Hãy chú ý đến sự an toàn khi kết nối và sử dụng các cột sắc ký, đeo găng tay, mặt nạ và gương bảo vệ, và rò rỉ dung môi và mẫu do bất kỳ lý do nào (kết nối đường dây không chặt chẽ, lão hóa đường dây, lão hóa đầu PEEK) tiếp xúc trực tiếp với người vận hành sẽ ảnh hưởng đến sức khỏe của người vận hành.
Hướng sử dụng
Cột sắc ký trong quá trình sử dụng để giữ cho hướng pha chảy và hướng mũi tên được đánh dấu bởi cột sắc ký nhất quán, nếu không có trường hợp đặc biệt, không nên sử dụng ngược lại (ví dụ: rửa ngược tốc độ dòng chảy thấp có thể được xem xét khi làm sạch các chất gây ô nhiễm của cột trước của cột sắc ký)
Kích hoạt
Cột đặc biệt mới của hydrochloride hydrochloride được xuất xưởng với pha lỏng trong cột là acetonitrile, và cột có thể bị khô ngắn trong quá trình lưu trữ và vận chuyển,Vì vậy, trước khi sử dụng cột mới cần phải sử dụng axetil lớn hơn 20 lần thể tích cột để kích hoạt với tốc độ dòng chảy 0,5 mL/phút trước khi chọn điều kiện hoạt động cần thiết cho thí nghiệm để cân bằng, nếu giai đoạn dòng chảy cần thiết cho thí nghiệm có đệm, cần phải sử dụngQuá trình chuyển đổi được thực hiện với pha hữu cơ và nước tỷ lệ bằng nhau với dòng chảy để tránh hiện tượng muối.
Xử lý mẫu trước
Để tránh các tạp chất hạt trong mẫu hoặc pha chảy gây tắc nghẽn trên tấm sàng phía trước của cột sắc ký, tất cả các tác nhân và mẫu được sử dụng trong thí nghiệm phải được lọc bằng màng lọc microporous 0,45μm hoặc 0,22μm trước khi sử dụng. Đối với các mẫu có ma trận phức tạp hơn, nên sử dụng hệ thống chiết pha rắn SPE để xử lý tiền xử lý.
Pha chảy và mẫu pH
Để làm cho cột sắc ký có được tuổi thọ và hiệu quả tốt hơn, vui lòng làm theo các nhà sản xuất đề nghị sử dụng trong phạm vi pH, cột đặc biệt hydrochloride hydrochloride pH áp dụng từ 2,0-6,0, pH quá cao sẽ làm cho silicone hòa tan, pH quá thấp sẽ dẫn đến một số hoặc tất cả các pha liên kết rơi ra, hiệu suất cột giảm, tạo ra kết quả thí nghiệm không tái tạo.
Pha chảy và dung môi mẫu
Pha chảy nên tránh sử dụng phosphate hoặc muối đệm khác không hòa tan với pha hữu cơ theo hệ thống pha hữu cơ cao và tránh làm hỏng cột sắc ký do muối phân. Để không can thiệp vào cơ chế tách HILIC, không sử dụng axit trifluoroacetic và các tác nhân ion khác. Nếu có thể, hãy cố gắng chọn mẫu hòa tan pha chảy, không sử dụng nước hoặc DMSO để hòa tan mẫu, tránh sự suy giảm đỉnh do hiệu ứng dung môi.
Cột áp lực nhẹ
Nhiệt độ hoạt động tối đa nên thấp hơn 60 ℃, sử dụng lâu dài ở nhiệt độ cao (>60 ℃) sẽ làm hỏng cột sắc ký, tình trạng này được thể hiện rõ nhất ở Ph>6.0. Cột sắc ký có thể chịu được áp suất 400Bar, nhưng ở trạng thái áp suất cao trong một thời gian dài sẽ ảnh hưởng đến hiệu suất và tuổi thọ của cột sắc ký, khi sử dụng hoạt động bình thường, áp suất cột nên thấp hơn 200Bar.
Cột bảo vệ
Khi thực hiện phân tích mẫu phức tạp hơn với ma trận, để có tuổi thọ tốt hơn cho cột sắc ký, nên sử dụng cột bảo vệ trước cột sắc ký để ngăn chặn các hạt trong hệ thống và làm chậm sự ô nhiễm hóa học của mẫu vào pha cố định.
Thủ tục xả
Sau khi sử dụng xong cột sắc ký cần lần lượt sử dụng 50% acetonitrile, 5% acetonile, 100% acetonile với 0,5 mL/phút để rửa ít nhất 20 lần thể tích cột, nếu trước cột có cột bảo vệ kết nối, cần phải rửa tương ứng với cột sắc ký ngắt kết nối.
Lưu trữ
Khi lưu trữ cột sắc ký, không có nước hoặc chất đệm còn lại trong cột sắc ký và acetonitrile có thể được sử dụng làm dung môi cô lập cho cột sắc ký. Cột sắc ký không sử dụng trong một thời gian dài Để ngăn chặn giường cột khô, bạn nên rửa cột sắc ký thường xuyên, rửa xong bằng cách cắm đầu vào hai cột sắc ký
