Axit lactic là một sản phẩm phụ trao đổi chất không thể tránh khỏi trong quá trình nuôi cấy tế bào, và sự tích tụ axit lactic không phải là điều bạn muốn thấy, vì sự tích tụ các sản phẩm phụ trao đổi chất này có thể ảnh hưởng đến sự tăng trưởng tế bào, sản xuất protein và chất lượng, v.v. Bài viết này cung cấp một cái nhìn tổng quan ngắn gọn về lý do tại sao axit lactic ảnh hưởng đến sự phát triển của tế bào và làm thế nào để giảm độc tính tế bào của nó.

Giai đoạn đầu nuôi cấy tế bào CHO thường có một lượng nhỏ axit lactic tích tụ, đặc biệt là trong giai đoạn tăng trưởng logarit khi các tế bào chuyển hóa mạnh, trong điều kiện bình thường, các tế bào có thể tiêu thụ hết các axit lactic này. Nhưng đôi khi điều này không suôn sẻ với một số chủng tế bào và sự tích tụ axit lactic gây tử vong cho các tế bào. Axit lactic chủ yếu có nguồn gốc từ glucose.Đầy đủOxy hóa, sự tích tụ axit lactic sẽ làm giảm độ pH của hệ thống, và dung dịch kiềm được thêm vào để tăng độ pH thường sẽ làm tăng áp suất thẩm thấu của hệ thống, do đó ảnh hưởng đến sự tăng trưởng và trao đổi chất bình thường của tế bào. Nếu không thêm dung dịch kiềm để điều chỉnh pH, môi trường pH thấp không phải là tin tốt cho các enzyme trong cơ thể tế bào, việc giảm hoạt động của enzyme sẽ hạn chế sự trao đổi chất của tế bào và ảnh hưởng đến sự phát triển của tế bào.

Để loại bỏ tác động của axit lactic đối với sự tăng trưởng tế bào và sản xuất protein, hãy xem xét xây dựng các chủng tế bào có khả năng chịu được căng thẳng môi trường cao, cũng như tối ưu hóa các chiến lược nuôi cấy tế bào. Thay thế glucose làm nguồn carbon bằng các loại đường chuyển hóa chậm có thể làm giảm sự tích tụ axit lactic như galactose, fucose và maltose.

Và khi axit lactic có sự tích tụ nhất định, nó có thể thay đổi đường dẫn trao đổi chất của tế bào thông qua nồng độ glucose, chuyển hóa glucose thành chuyển hóa axit lactic, do đó làm giảm sự tích tụ axit lactic, nhưng chiến lược tiêu thụ axit lactic ít đường ảnh hưởng đến chất lượng protein không rõ ràng. Biến đổi gen tế bào cũng có thể làm giảm sự tích tụ lactate, chẳng hạn như loại bỏ gen lactate dehydrogenase (LDH), khuếch đại gen pyruvate carboxylase (PYC2), v.v. LDH là một enzyme quan trọng để xúc tác pyruvate tạo ra lactate, PYC2 là enzyme xúc tác tham gia vào việc chuyển đổi lactate, pyruvate, axit amin và glycerin thành glucose, và biến đổi gen của cả hai có thể làm giảm sự tích tụ lactate trong con đường trao đổi chất.

Các phương pháp trên, mặc dù có thể làm giảm sự tích tụ axit lactic, không hoạt động mạnh. Hạt chia organic (Việc bổ sung Gu2+) cho đến nay là cách tốt nhất để giảm sự tích tụ lactate, loại bỏ tác dụng ức chế sự tích tụ lactate của Gu2+, được đề cập trong nhiều nghiên cứu để thúc đẩy sự phát triển của tế bào.
Vì vậy, nếu bạn cần phát hiện glucose và axit lactic trong thời gian thực,Müller, ĐứcMáy phân tích axit lactic glucoseLà lựa chọn không tồi của ngài.