Nghiên cứu được thực hiện bởi Khoa Sinh học Nha khoa, Đại học Khoa học Y tế HokkaidoTakeharu NiiokaNhóm đã công bố.Lưu trữ của Oral BiologyTạp chí. Nghiên cứu tập trung vào cơ cắn chuột, xoay quanh ba câu hỏi:1) Dây thần kinh giao cảm chi phối mạch máu có hoạt tính đường ruột không?Vip) phản ứng miễn dịch; （2) Tiêm tĩnh mạchVipCó gây giãn mạch máu hay không; （3Trong sự hiện diện hoặc vắng mặt của atropine, chọn lọcVipĐối kháng thụ thể[4Cl-D-Phe] ⁶,Leu¹⁷]VIPẢnh hưởng đến giãn mạch thần kinh giao cảm.

Tóm tắt

Các sợi tâm trương đối giao cảm được biết là chi phối các mạch máu của cơ cắn chuột thông qua các cơ chế cholinergic và không cholinergic, nhưng cơ chế không cholinergic vẫn chưa được xác định. thuốc nhét hậu môn suppositoires (VipNó đã được xác nhận là tham gia vào quá trình giãn mạch thần kinh giao cảm ở miệng và hàm mặt (như tuyến dưới hàm và môi dưới), tuy nhiên nghiên cứu về cơ cắn của chuột là rất hạn chế. Nghiên cứu này đã xem xét cơ cắn chuột và được thiết kế để đánh giá:(1Thần kinh giao cảm chi phối mạch máu cóVipphản ứng miễn dịch; （2) Tiêm tĩnh mạchVipCó gây giãn mạch máu hay không; （3Trong sự hiện diện hoặc vắng mặt của atropine, chọn lọcVipĐối kháng thụ thể[4Cl-D-Phe] ⁶,Leu¹⁷]VIPẢnh hưởng đến giãn mạch thần kinh giao cảm. mạc đường ruột muqueuses digestives (Nguyên ThầnCác sợi thần kinh xung quanh mạch máu được phát hiện ở cả hai vị trí.VipPhản ứng miễn dịch. Tiêm tĩnh mạchVipCó thể gây giãn mạch máu, và......[4Cl-D-Phe] ⁶,Leu¹⁷]VIPCó thể suy yếu.VipHiệu ứng giãn mạch do tiêm. Sử dụng riêng[4Cl-D-Phe] ⁶,Leu¹⁷]VIPKhông thể ngăn chặn giãn mạch thần kinh giao cảm, nhưng khi[4Cl-D-Phe] ⁶,Leu¹⁷]VIPKhi kết hợp với atropine, giãn mạch đối giao cảm có thể bị suy yếu. Kết quả cho thấy:(1) Sự hiện diện của các dây thần kinh giao cảm sau điều khiển mạch máu cơ cắnVip；（2) Tiêm tĩnh mạchVipCó thể dẫn đến giãn mạch cơ cắn; （3Khi các thụ thể cholinergic muscarinic bị chặn bởi atropine hoặc acetylcholine (ACh) Khi giải phóng bị ức chế và ngừng hoạt động,VipCó thể tham gia vào quá trình giãn mạch đối giao cảm của cơ cắn.

Thử nghiệmVật liệu&dụng cụ

(I) Vật liệu thí nghiệm

1. Động vật thí nghiệm: Con đực trưởng thànhcủa Wistarchuột;

2. Chất đánh dấu và thuốc thử:2%Vàng huỳnh quang, nước muối sinh lý vô khuẩn,VipChọn lọcVipĐối kháng thụ thể[4Cl-D-Phe] ⁶,Leu¹⁷]VIP, atropine, uratan, pancuronium;

3. Kháng thể và thuốc thử liên quan đến nhuộm:VipKháng thể, kháng thể vận chuyển acetylcholine túi,Alexa-488Đánh dấu lừa chống thỏIgGKháng thể,Alexa-568Đánh giá Donkey Anti GoatIgGKháng thể, huỳnh quang đánh dấu ricin lectinTôi、1%Huyết thanh lừa không miễn dịch.0.3%NameX-100、0.3%Protein trong huyết thanh bò.4%Đa tụ giáp,0.1MDịch giảm xóc phốt pho,30%Đường mía;

(ii) Dụng cụ thí nghiệm

4. OmegawaveSản phẩm FLO-C1 Máy đo máu Doppler Laser、Kính hiển vi huỳnh quang、Kính hiển vi quét laser co-focus、Máy đông lạnh、HamiltonỐng tiêm vi lượng、Pad sưởi ấm、Máy thở nhân tạo、Ống thông (để đặt ống thông tĩnh mạch đùi và động mạch đùi)

OmegawaveSản phẩm FLO-C1Máy đo máu Doppler Laser

Quy trình thử nghiệm

1. Nuôi động vật và phê duyệt đạo đức

2. Thí nghiệm đánh dấu kép huỳnh quang

3. Miễn dịch nhuộm

4. Đo lưu lượng máu cơ cắn: Cắt đứt dây thần kinh phế vị hai bên cổ và khô giao cảm trên cổ trước khi thí nghiệm để loại trừ ảnh hưởng của dây thần kinh phế vị và giao cảm. Bằng cách kích thích điện trung tâm thần kinh lưỡi bên trái cắt đứt đầu gây ra giãn mạch phản xạ đối giao cảm của cơ cắn, vớiOmegawaveSản phẩm FLO-C1 Máy đo máu Doppler LaserNghiên cứu Khoa học-Công nghệ (MBF) Thay đổi. Mỗi liều IV khác nhau.VipQuan sátMBFthay đổi; Trong tiêm100ng / kg VIPtrước20phút, truyền liên tục.[4Cl-D-Phe] ⁶,Leu¹⁷]VIPQuan sát nó.VipViệtMBFẢnh hưởng của việc nâng cao Ngoài ra, sau khi tiêm atropine tĩnh mạch, truyền liên tục, tương ứng[4Cl-D-Phe] ⁶,Leu¹⁷]VIPKhi, và khi kết hợp cả hai, kích thích điện dây thần kinh lưỡi, ghi lạiMBFThay đổi, kết quả được thể hiện bằng tỷ lệ phần trăm của phản ứng kiểm soát trước khi dùng thuốc.

OmegawaveSản phẩm FLO-C1Máy đo máu Doppler Laser

（MộtHạt chia organic (LN) Kích thích điện (đối chiếu) và truyền tĩnh mạch.VipLiều lượng là......1、10 và100 ng / kg(Dẫn đến lưu lượng máu trung bình)MBF) Một ví dụ điển hình về sự gia tăng.

(B)Tổng hợp các mũi tiêm. 0(Chỉ có nước muối sinh lý),1、10 và100 ng / kg VIPSau đó gây ra.MBFphương trình (n = 4）。 Dữ liệu lấyLNTỷ lệ phần trăm của phản ứng kiểm soát do kích thích điện được biểu thị.

(C)（C) Chọn lọcVipthuốc nhét hậu môn suppositoires ([4 -Chlorine- D -Name,Name]peptide ruột hoạt động mạch,[4Cl-D-Phe]⁶Lưu¹⁷[VIP]Khi có và không có tiêm100 ng / kg VIPViệtMBFMột ví dụ điển hình về sự gia tăng

(D)（D）[4Cl-D-Phe]⁶Lưu¹⁷[VIP]Phải.100 ng / kg VIPTiêm gây raMBFTỷ lệ phản hồi (n = 5）。

5. Phân tích thống kê

Kết luận thí nghiệm

1. Sự hiện diện của các dây thần kinh parasympathy chi phối các mạch máu cơ cắn của chuộtVipphản ứng miễn dịch vàVipVớiVAChT(dấu hiệu cholinergic) trong hạch taiFGSự hiện diện của co-location trên các tế bào thần kinh được đánh dấu, cũng như trên các sợi thần kinh xung quanh các mạch máu của cơ cắn;

2. Tiêm tĩnh mạchVipGây giãn mạch cơ cắn ở chuột theo cách phụ thuộc liều lượng và không ảnh hưởng đến huyết áp động mạch toàn thân, chọn lọcVipĐối kháng thụ thể[4Cl-D-Phe] ⁶,Leu¹⁷]VIPCó thể ức chếVipHiệu ứng giãn mạch này gây ra, cho thấyVipBằng cách kích hoạt thành mạch máu của cơ cắn.VipCác receptor hoạt động;

3. Sử dụng riêng[4Cl-D-Phe] ⁶,Leu¹⁷]VIPKhông ảnh hưởng đến giãn mạch đối giao cảm cắn do kích thích thần kinh lưỡi, tác dụng giãn mạch này có thể bị suy yếu một phần khi sử dụng atropine một mình; Và khi[4Cl-D-Phe] ⁶,Leu¹⁷]VIPKhi kết hợp với atropine, tác dụng giãn mạch này có thể bị ức chế, gợi ý rằng khi các thụ thể muscarinic bị chặn bởi atropine hoặc khi giải phóng acetylcholine bị ức chế,VipTham gia vào điều hòa giãn mạch đối giao cảm của cơ cắn.