Phương pháp sử dụng máy đùn liposome đẩy tay có thể được chia thành các bước sau, kết hợp với các điểm hoạt động và các biện pháp phòng ngừa được tóm tắt như sau:
1.Chuẩn bị trước khi vận hành
1, Kiểm tra thành phần và tiền xử lý
Kiểm tra xem O-ring có bị mòn hay không và tránh rủi ro giảm áp bằng cách thay thế các bộ phận ban đầu nếu cần.
Rửa kỹ các thành phần đùn (chẳng hạn như màng, tấm lỗ micron), nên làm sạch bằng siêu âm và ép trước nhiều lần bằng nước tinh khiết để đảm bảo lối đi thông suốt.
Màng polycarbonate cần loại bỏ màng bảo vệ màu xanh, chỉ giữ lại màng trắng, khi lắp đặt được thấm với mẫu để tránh bong bóng không khí ảnh hưởng đến hiệu quả đùn.
2, tiền xử lý mẫu
Nếu dịch hỗn hợp liposome chứa các hạt viên lớn hoặc các vật tập hợp, đề nghị trước tiên thông qua xử lý đồng nhất để giảm nhỏ kích thước hạt viên, tránh làm chặn màn lọc.
Đảm bảo rằng mẫu đã được phân tán đều và giảm nguy cơ kết tủa.
2. các bước hoạt động
1, Lắp ráp và lắp ráp mẫu
Nhấn "Cấu trúc bánh sandwich" để cài đặt kết hợp màng lọc (chẳng hạn như màng polycarbonate+màng hỗ trợ lọc).
Nạp mẫu tiền xử lý vào ống tiêm thủy tinh kín khí, kết nối khoang đùn, đảm bảo vít nhẹ được cố định sau khi cắm xuống đáy dọc theo lỗ kim.
2, Hoạt động đùn
Ép đùn đầu tiên: Đẩy piston ống tiêm từ từ và đồng đều, giữ hướng lực phù hợp với trục ống tiêm, để mẫu chảy qua màng lọc đến ống tiêm rỗng ở phía bên kia.
Nhiều đùn: trao đổi vị trí ống tiêm ở cả hai bên sau khi hoàn thành, đẩy lặp đi lặp lại để đạt được nhiều đùn (thường cần 3-10 lần) cho đến khi đạt được yêu cầu về kích thước hạt trung bình.
Nhu cầu kiểm soát nhiệt độ: Nếu cần vận hành nhiệt độ không đổi, toàn bộ thiết bị có thể được đặt trong bồn tắm nước nóng.
3, Thận trọng
1, Thông số kỹ thuật hoạt động
Duy trì lực đều trong suốt quá trình, tránh lệch hướng dẫn đến ống tiêm bị gãy hoặc rò rỉ.
Chỉ cần vặn nhẹ để cố định ống tiêm khi nó được thắt chặt, và lực quá mức có thể làm hỏng cấu trúc ren.
2, Xử lý sự cố
Vấn đề rò rỉ: ưu tiên kiểm tra xem đai ốc có thắt chặt hay không; Nếu vẫn bị lỗi nước cần lắp lại màn lọc hoặc thay thế linh kiện đóng dấu.
Khó đùn: Kiểm tra xem màng lọc có bị tắc hay không, hoặc xác nhận rằng màng bảo vệ màu xanh không được lắp sai.
4.Tư vấn tối ưu
Lựa chọn kích thước mẫu: Máy đùn đẩy tay phù hợp với mẫu dấu vết (0-1 mL), đề nghị kiểm tra các thông số quy trình với số lượng nhỏ trong giai đoạn đầu của thí nghiệm.
2, lựa chọn khẩu độ màng: theo kích thước hạt mục tiêu để chọn kích thước lỗ chân lông phù hợp của màng khắc xuyên tâm (chẳng hạn như màng 100 nm có thể thu được liposome có kích thước hạt khoảng 100 nm).
3, Ghi lại các thông số: Ghi lại số lần đùn, thay đổi áp suất và phân phối kích thước hạt cuối cùng để tối ưu hóa quy trình.
Với các bước trên, việc chuẩn bị đồng nhất kích thước hạt của liposome có thể được hoàn thành hiệu quả, đồng thời giảm nguy cơ hoạt động.