I. Chuẩn bị trước khi hoạt động
1, Làm sạch và khử trùng
Làm sạch tháo rời: Sau khi tháo rời các bộ phận khác nhau của lò phản ứng (thân xe tăng, đường ống, điện cực, v.v.), rửa sạch bằng cách ngâm nước tẩy rửa và dung dịch natri hydroxit 1%, rửa sạch bằng nước tinh khiết hơn 10 lần.
Xử lý khử trùng: Các bộ phận làm sạch được ngâm trong dung dịch khử trùng (pha loãng theo tỷ lệ) trong 30 phút, tránh tiếp xúc trực tiếp với bề mặt sau khi sấy khô.
Bảo trì cảm biến: Các điện cực pH được ngâm trong dung dịch KCl bão hòa, điện cực oxy hòa tan (DO) thay thế điện phân và loại trừ bong bóng, phân cực trong hơn 6 giờ.
2, Lắp ráp xe tăng
Niêm phong cài đặt: căn chỉnh nắp xe tăng với cơ sở của xe tăng, thắt chặt vít theo đường chéo bằng công cụ lục giác bên trong để đảm bảo độ kín.
Kết nối đường ống Kết nối chai bổ sung, chai xả, chai lấy mẫu, v.v., bằng ống silicone hoặc khớp nối nhanh, thắt chặt bằng tay sau khi điện cực được chèn vào giao diện tương ứng.
II. Hoạt động trên bể
1, Tiêm chủng tế bào
Sau khi trộn đều đình chỉ tế bào nuôi cấy trước khi đếm, chuyển đến chai tiêm và kết nối vô trùng với ống dẫn vào lò phản ứng.
Sử dụng khí nén để treo các tế bào vào lò phản ứng, tránh các khối lắng đọng tế bào.
2, Khởi tạo tham số
Cài đặt môi trường: Nhiệt độ được đặt ở 37 ℃ (tế bào động vật có vú), oxy hòa tan 40%, pH khoảng 7,0, bắt đầu điều chỉnh tự động thông qua bảng điều khiển.
Bổ sung&Thông khí Bơm nhu động kiểm soát tốc độ bù nước, hệ thống nạp khí điều chỉnh áp suất oxy đến 0,1 MPa, đảm bảo oxy hòa tan ổn định.
III. Kiểm soát quá trình nuôi cấy
1, Giám sát động
Liên kết cảm biến: theo dõi nhiệt độ, pH, DO và các thông số khác trong thời gian thực, bộ điều khiển tự động điều chỉnh tốc độ khuấy (100-300 vòng/phút) và tốc độ bổ sung.
Lấy mẫu trực tuyến: Mỗi 24 giờ lấy mẫu để phát hiện mật độ tế bào và trạng thái trao đổi chất, sau khi lấy mẫu, đầu dòng được ngâm với rượu 75% để ngăn ngừa ô nhiễm.
2, Kiểm soát ô nhiễm
Toàn bộ quá trình vận hành duy trì môi trường vô trùng, sử dụng miệng kết nối khử trùng ngọn lửa, tránh tạp chất bên ngoài xâm nhập.
IV. Vận hành và bảo trì bể dưới
1.Chấm dứt nuôi cấy
Tắt mô-đun điều khiển tự động và xả chất lỏng nuôi cấy vào thùng chất thải bằng khí nén, ngắt kết nối điện cực.
2, Làm sạch và lưu trữ
Loại bỏ các cụm thân xe tăng và ngâm qua đêm trong dung dịch NaOH 0,1M sau khi rửa sạch bằng nước tinh khiết, loại bỏ hoàn toàn dư lượng sinh học.
Lưu trữ ở nơi thông gió sau khi sấy khô, các điện cực được lưu trữ riêng trong hộp đóng gói đặc biệt.
V. Những lưu ý chính
Kiểm tra độ kín: Kiểm tra áp suất cần được thực hiện sau khi lắp ráp để tránh rò rỉ trong quá trình nuôi cấy.
2, Hiệu chuẩn thông số: Trước mỗi lần sử dụng cần chỉnh điện cực pH và DO để đảm bảo độ chính xác của dữ liệu.
3, khuếch đại quy mô: theo tỷ lệ khối lượng thông khí không đổi với khối lượng chất lỏng (VVM), đảm bảo hiệu quả truyền oxy hòa tan phù hợp.
Thông qua các bước trên, lò phản ứng sinh học tế bào bằng thép không gỉ có thể đạt được nuôi cấy tế bào ổn định từ phòng thí nghiệm đến quy mô thử nghiệm, thích hợp cho các quy trình sinh học có độ chính xác cao như sản xuất kháng thể và phát triển vắc-xin.